反相C18 Flash色谱柱使用注意事项
之前我们讨论了很多关于反相色谱分离的各类实际操作案例和使用方案,但我们仍然收到很多的关于反相色谱柱使用问题的咨询,很多人对于什么是反相以及拥有了反相Flash色谱柱之后的使用和保存,仍然存在着很多疑问,今天我们为您列举了C18色谱柱在使用过程中的一些注意事项,希望对您的实验有所帮助。


使用前,色谱柱使用前需要使用100%有机溶剂(推荐乙腈)进行活化,低流速慢慢冲洗,这样可以使得C18链可以在整个有机溶剂体系中得到足够的伸展,使固定相能充分润湿、碳链舒展彻底,使色谱柱的性能达到好状态。
反相C18在使用之后,需要保存在100%有机溶剂当中(推荐乙腈),切记不可吹干后保存,压干后容易使得C18键断裂,影响柱效和后期分离效果。
Flash C18色谱柱往往不可完全置于100% 水相当中,这样会使得C18链蜷缩,进而影响柱效。因此在起始比例设置方面,一般我们推荐从5% 或者10% 的有机相比例作为起始比例,请避免使用100%的纯水作为起始比例。因为在开始分离前,色谱柱保存在有机相当中,我们需要将100%有机相慢慢回调至起始比例,平衡一段时间后,才可开始正式分离。
一般反相 Flash C18色谱柱所支持的pH范围为:3-12之间,任何大于或者低于此数值的流动相体系都不有利于色谱柱寿命。
常规的两种反相C18流动相体系为:水-甲醇;水-乙腈。
在使用过程中的任何时候以及后期的保存,请不要将色谱柱干掉,一定要让其沉浸在溶剂之中。
流动相极性在进行转换时,跨度不宜过大,以免过度不匀,同时放热产生气泡影响分离、
在色谱柱使用完成后,需使用纯有机溶剂(乙腈或者甲醇)对对色谱柱进行冲洗,保证没有样品残留,如样品为离子型,则需要用10CV以上的溶剂冲洗,确保无残留。
若色谱柱处于长期闲置状态时,要将色谱柱彻底冲洗,建议冲洗10CV以上,保存在纯有机试剂或高比例的有机试剂溶液(如90%甲醇水,或者100%乙腈)中;
色谱柱在长时间使用中,压力会随着各种各样的样品的使用而形成缓慢上升的状况,如压力增大明显,可适时用大量甲醇或者乙腈进行冲洗,可使色谱柱恢复部分活性,提升一些柱效。/文:Biotage
-
LAUDA Ecoline校验专用恒温器:应用于校准和调节温度
LAUDA Ecoline校验专用恒温器:应用于校准和调节温度,温度范围从-30到200℃ 校准和调节完整的高性能的解决方案 LAUDA校验专用恒温器为校准和调节提供了一个稳定的恒温和均一性良好的测试腔环境。根据测试所……
-
SinapTec LabHF for Cup Horn超声波处理系统:专注超声化学
SinapTec LabHF for Cup Horn 典型应用 •酶/DNA提取 •反应加速 •细菌破坏 •声化学 •细胞溶解 •提取… 特点: NexTgen实验室高频发生器 •功率:1000WRMS •振幅设置:10%–100% •工作频率:固定频率 •尺寸(长x宽x高)……
-
美国Boekel原位杂交仪Slide Moat
美国Boekel原位杂交仪Slide Moat 特点: 利用PID温度控制器可以快速升温 无需等待塑料或者纸巾提供温度,加快杂交时间 加热单元有密封垫的加热玻璃盖 相对于热循环做载玻片的仪器, 该杂交仪更廉价 参数: 外形尺……
-
PA针式水听器:Precision Acoustics PVdF针式水听器探头
PA提供全系列的水听器,用于测量超声领域的压力。我们的设备用于测量所需的声学参数,以满足 IEC62127-1、NEMA UD2 或 FDA 510(k) 提交的新法规要求。 针式水听器 PA的的高性能针式水听器系统由一系列可互换的PVd……
-
BUCHI旋转蒸发仪R-100:经济型蒸发解决方案
BUCHI旋转蒸发仪R-100:经济型蒸发解决方案 BUCHI旋转蒸发仪R-100 是一款入门级旋转蒸发仪,旨在满足经济蒸发的基本需要,符合 BUCHI 高品质标准。 蒸发瓶尺寸:50 – 4000 mL 升降机制:手动 温度范围:20 – 95 °C……
-
Flash纯化时,什么时候需要使用ELSD(蒸发光散射检测器)?
Flash快速色谱看似简单,但其实可能很复杂。溶剂选择、色谱柱大小、固定相、载样技术、梯度方法、流速和检测参数都是影响快速色谱和您成功使用该纯化技术的因素。在这些变量中,检测参数(即检测器类型)确确实实会……
-
Sonics VC505超声波细胞破碎仪
Sonics VC505:适用于中小批量应用的超声波处理器 500瓦超声波处理器可安全处理各种有机和无机材料,从 250 微升到 1 升*。典型应用包括纳米技术(生产纳米颗粒材料和石墨烯分散体)、细胞裂解、样品制备、均质化、C……
-
ONDA HFO-690 光纤水听器
ONDA HFO-690 光纤水听器 HFO-690是新一代光纤水听器,旨在为 HIFU 等应用的高强度场提供独特支持,同时提供声压和温度测量。 主要特点和优势 支持高达 500MPa 的高声压 带宽限制滤波器可降低噪声等效压力 易于使……
-
Biotage Selekt快速制备液相色谱
Biotage全新一代快速纯化色谱系统Selekt,使用Biotage全新研发的操作系统,并拥有专门中文操作软件,15寸超大交互界面,保证所有功能集成于一面,操作简单,易于上手,同时系统会记住用户的使用习惯,让您发现它的……
