反相C18 Flash色谱柱使用注意事项

进口实验室仪器过柱机 26-02-05 16:35:22

之前我们讨论了很多关于反相色谱分离的各类实际操作案例和使用方案,但我们仍然收到很多的关于反相色谱柱使用问题的咨询,很多人对于什么是反相以及拥有了反相Flash色谱柱之后的使用和保存,仍然存在着很多疑问,今天我们为您列举了C18色谱柱在使用过程中的一些注意事项,希望对您的实验有所帮助。

图片
由于C18色谱柱是通过C碳链进行修饰而来,因此几乎不会对样品有强烈保留,从而保证了其具有可重复使用的特性,为了保证其具有较长的寿命,反相Flash色谱柱的使用规则往往和常规的正相有所区别。

图片
经典的反相硅胶表面的图示。C-18的烷基链键合在硅胶表面,增加了硅胶的疏水性。

使用前,色谱柱使用前需要使用100%有机溶剂(推荐乙腈)进行活化,低流速慢慢冲洗,这样可以使得C18链可以在整个有机溶剂体系中得到足够的伸展,使固定相能充分润湿、碳链舒展彻底,使色谱柱的性能达到好状态。

反相C18在使用之后,需要保存在100%有机溶剂当中(推荐乙腈),切记不可吹干后保存,压干后容易使得C18键断裂,影响柱效和后期分离效果。

Flash C18色谱柱往往不可完全置于100% 水相当中,这样会使得C18链蜷缩,进而影响柱效。因此在起始比例设置方面,一般我们推荐从5% 或者10% 的有机相比例作为起始比例,请避免使用100%的纯水作为起始比例。因为在开始分离前,色谱柱保存在有机相当中,我们需要将100%有机相慢慢回调至起始比例,平衡一段时间后,才可开始正式分离。

一般反相 Flash C18色谱柱所支持的pH范围为:3-12之间,任何大于或者低于此数值的流动相体系都不有利于色谱柱寿命。

常规的两种反相C18流动相体系为:水-甲醇;水-乙腈。

在使用过程中的任何时候以及后期的保存,请不要将色谱柱干掉,一定要让其沉浸在溶剂之中。

流动相极性在进行转换时,跨度不宜过大,以免过度不匀,同时放热产生气泡影响分离、

在色谱柱使用完成后,需使用纯有机溶剂(乙腈或者甲醇)对对色谱柱进行冲洗,保证没有样品残留,如样品为离子型,则需要用10CV以上的溶剂冲洗,确保无残留。

若色谱柱处于长期闲置状态时,要将色谱柱彻底冲洗,建议冲洗10CV以上,保存在纯有机试剂或高比例的有机试剂溶液(如90%甲醇水,或者100%乙腈)中;

色谱柱在长时间使用中,压力会随着各种各样的样品的使用而形成缓慢上升的状况,如压力增大明显,可适时用大量甲醇或者乙腈进行冲洗,可使色谱柱恢复部分活性,提升一些柱效。/文:Biotage

仪器推荐
  1. 上海书俊人才招聘

    上海书俊人才招聘

    上海书俊主要从事制药设备,生化仪器,分析仪器,试验设备等产品的推广应用工程与技术的引进和开发。我们积极与科研院校及国内外公司建立广泛而密切的合作关系。做为美国Sonics、Boekel、英国 Sherwood、德国Systec……

    公司介绍 2026-02-13

  2. 上海书俊企业文化

    上海书俊企业文化

    上海书俊仪器设备有限公司成立于2013年,致力于将全球的仪器和技术引入中国,为高校,科研院所,企业等系统客户提供完整的解决方案及优质的售后服务。现在全国设有北京、广州、武汉、南京、杭州、厦门、西安、成……

    公司介绍 2026-02-10

  3. OHAUS ST400D 溶解氧测定仪

    OHAUS ST400D 溶解氧测定仪

      OHAUS ST400D是一款使用简便,不需维护的光学科技原理的便携式溶解氧测定仪。ST400D对于需要简便而准确测量溶氧含量的用户的选择。     荧光原理,不需维护 — 光学电极几乎不需维护,不需像电化……

    进口仪器 2026-02-07

  4. 英国PA聚焦超声换能器:500kHz至50MHz

    英国PA聚焦超声换能器:500kHz至50MHz

    Precision Acoustics凭借一系列标准,我们可根据您的特定需求生产定制的PVdF或陶瓷传感器。我们为从水下到CT和MRI系统的各种应用和环境开发了定制换能器,涵盖500 kHz至50 MHz及以上的频率范围。   1-3个压……

    Precision Acoustics 2026-02-01

  5. RP-10 Series 低中强度(LI & MI)高精度声学水密计

    RP-10 Series 低中强度(LI & MI)高精度声学水密计

      RP-10 Series High Intensity PVDF Hydrophones 低中强度声学水密计 低中强度型(LI & MI)水听器具有高灵敏度和宽带宽, 专用于测量高强度聚焦超声换能器聚焦区域发出的声能量. 在低(或中)功率实验中,水……

    rp-acoustics 2026-02-13

  6. LAUDA Proline校验恒温器:温控范围-40到300C

    LAUDA Proline校验恒温器:温控范围-40到300C

      LAUDA Proline校验恒温器:提供温度范围从-40到300C的校准和调整 校准和调整所需的高性能全面的解决方案 LAUDA校验专用恒温器为校准和调节提供了一个稳定的恒温和均一性良好的测试腔环境。根据测试所需要的……

    LAUDA,进口温控 2026-02-14

今日仪器
  1. Drummond Nanoject II 自动纳升注射器

    Drummond Nanoject II 自动纳升注射器

    精细的程序需要高超的技术 Nanoject II Auto-Nanoliter Injector 提供了重要的选项和控制,非常适合对卵母细胞、胚胎和组织进行超精细的工作。注射量范围在 2.3 纳升和 69.0 纳升之间,有 16 种可选增量。 可选速……

    Drummond,代理品牌,进口仪器 2026-02-15

  2. BUCHI R-220 EX防爆工业级旋转蒸发仪

    BUCHI R-220 EX防爆工业级旋转蒸发仪

    防爆工业级旋转蒸发仪 R-220 EX:防爆保护实现高的安全等级 防爆工业级旋转蒸发仪 R-220 EX 蒸发瓶尺寸可达 20L。操作直观,带防爆保护,确保工业蒸馏安全。可根据需求定制您的防爆工业级旋转蒸发仪,满足防爆规……

    BUCHI,进口旋蒸 2026-02-15

  3. VELP AREX-6 Digital Pro加热磁力搅拌器

    VELP AREX-6 Digital Pro加热磁力搅拌器

    VELP AREX-6 Digital Pro加热磁力搅拌器 数显加热磁力搅拌器,带定时器、自动反转、CerAlTopTM板,确保温度调节性能和安全性。 优异的安全性能:保护操作者和样品。 AREX-6 Digital PRO有2个 独立的安全电路 ,可……

    VELP 2026-02-15

返回顶部小火箭