反相C18 Flash色谱柱使用注意事项
之前我们讨论了很多关于反相色谱分离的各类实际操作案例和使用方案,但我们仍然收到很多的关于反相色谱柱使用问题的咨询,很多人对于什么是反相以及拥有了反相Flash色谱柱之后的使用和保存,仍然存在着很多疑问,今天我们为您列举了C18色谱柱在使用过程中的一些注意事项,希望对您的实验有所帮助。


使用前,色谱柱使用前需要使用100%有机溶剂(推荐乙腈)进行活化,低流速慢慢冲洗,这样可以使得C18链可以在整个有机溶剂体系中得到足够的伸展,使固定相能充分润湿、碳链舒展彻底,使色谱柱的性能达到好状态。
反相C18在使用之后,需要保存在100%有机溶剂当中(推荐乙腈),切记不可吹干后保存,压干后容易使得C18键断裂,影响柱效和后期分离效果。
Flash C18色谱柱往往不可完全置于100% 水相当中,这样会使得C18链蜷缩,进而影响柱效。因此在起始比例设置方面,一般我们推荐从5% 或者10% 的有机相比例作为起始比例,请避免使用100%的纯水作为起始比例。因为在开始分离前,色谱柱保存在有机相当中,我们需要将100%有机相慢慢回调至起始比例,平衡一段时间后,才可开始正式分离。
一般反相 Flash C18色谱柱所支持的pH范围为:3-12之间,任何大于或者低于此数值的流动相体系都不有利于色谱柱寿命。
常规的两种反相C18流动相体系为:水-甲醇;水-乙腈。
在使用过程中的任何时候以及后期的保存,请不要将色谱柱干掉,一定要让其沉浸在溶剂之中。
流动相极性在进行转换时,跨度不宜过大,以免过度不匀,同时放热产生气泡影响分离、
在色谱柱使用完成后,需使用纯有机溶剂(乙腈或者甲醇)对对色谱柱进行冲洗,保证没有样品残留,如样品为离子型,则需要用10CV以上的溶剂冲洗,确保无残留。
若色谱柱处于长期闲置状态时,要将色谱柱彻底冲洗,建议冲洗10CV以上,保存在纯有机试剂或高比例的有机试剂溶液(如90%甲醇水,或者100%乙腈)中;
色谱柱在长时间使用中,压力会随着各种各样的样品的使用而形成缓慢上升的状况,如压力增大明显,可适时用大量甲醇或者乙腈进行冲洗,可使色谱柱恢复部分活性,提升一些柱效。/文:Biotage
-
Buchi R-300旋转蒸发仪:可搭配50mL-5000mL蒸发瓶
BUCHI R-300旋转蒸发仪:方便的旋转蒸发 旋转蒸发仪 R-300 满足旋转蒸发在便捷性和多功能性方面的高要求。其模块化设计允许将 R-300 扩展成一个全集成系统,在该系统中一个中央界面调节每个组件。 蒸发瓶尺寸:50 ……
-
OHAUS ST400D 溶解氧测定仪
OHAUS ST400D是一款使用简便,不需维护的光学科技原理的便携式溶解氧测定仪。ST400D对于需要简便而准确测量溶氧含量的用户的选择。 荧光原理,不需维护 — 光学电极几乎不需维护,不需像电化……
-
上海书俊公司简介
上海书俊仪器设备有限公司成立于2013年,致力于将全球的仪器和技术引入中国,为高校,科研院所,企业等系统客户提供完整的解决方案及优质的售后服务。现在全国设有北京、广州、武汉、南京、杭州、厦门、西安、成都……
-
染色质免疫沉淀(ChIP)技术的难点
染色质免疫沉淀技术(Chromatin Immunoprecipitation,简称ChIP)是研究体内蛋白质与DNA相互作用的一种技术。它利用抗原抗体的特异性反应,可以真实地反映体内蛋白分子与基因组DNA结合的状况。下面我们就基本的实验……
-
LAUDA Ecoline校验专用恒温器:应用于校准和调节温度
LAUDA Ecoline校验专用恒温器:应用于校准和调节温度,温度范围从-30到200℃ 校准和调节完整的高性能的解决方案 LAUDA校验专用恒温器为校准和调节提供了一个稳定的恒温和均一性良好的测试腔环境。根据测试所……
-
Biotage Extrahera HV-5000大体积样品制备工作站
新型 Biotage® Extrahera™ HV-5000 是一款支持 GLP 的自动化样品制备工作站,专用于基于色谱柱的样品制备,支持经典的 3-、6-、10- 和 15-mL SPE 和 SLE 色谱柱消耗品格式。 Biotage Extrahera优势: Biotage® Ex……
-
WARING 8010S/8010G/8010ES/8010EG 1L双速定时组织捣碎机
Waring 8010S/8010G/8010ES/8010EG 容量:1L/1.2L 开关设置:双速.机械定时器.60秒 底座:环氧树脂涂层 容器:带把手的不锈钢和两层聚乙烯和 聚苯乙烯盖子-8010S 带把手的耐热玻璃和两层聚乙烯和聚苯 乙烯盖子-801……
-
SMEG GW4090全自动洗瓶机
SMEG GW4090十大特点 全自动洗涤过程保证了极高的执行质量,确保了优良的可控制结果。 外壳使用SIAI 304不锈钢制造,洗涤腔使用SIAI 316L。 可卸式清洗篮架能按用户需求与基础推车自由组合,节省洗涤空间。 强制空……
-
上海书俊公司简介
上海书俊仪器设备有限公司成立于2013年,致力于将全球的仪器和技术引入中国,为高校,科研院所,企业等系统客户提供完整的解决方案及优质的售后服务。现在全国设有北京、广州、武汉、南京、杭州、厦门、西安、成都……